açın
ve bir numune olarak bir cuvet distile su koyarak ve çalıştırarak bunu sıfır
. Farklı spektrometre biraz farklı yazılım ya da operasyon imkanlara sahip olacak , ancak her distile su boş bir örnek ile nasıl kalibre için net talimatlar ile gelmelidir .
2
bilinen ilk örnek ile bir cuvet doldurun konsantrasyonu. Absorbans değerini belirlemek içinörnek çalıştırın. Örnek numarası,önceden bilinen konsantrasyon ve absorbans değeri de kaydedin . Örneğin, Örnek 1 litre başına 0,05 mol bir konsantrasyon ve 400
3 arasında bir emiciliğe sahip olabilir
sonraki numune ile taze cuvet doldurun ve spektrometre ile çalıştırın . Örnek sayısı , konsantrasyon ve emme kaydedin . Örneğin, Örnek 2 litre başına 0.5 mol bir konsantrasyon ve 4,000 arasında bir emiciliğe sahip olabilir . Üçüncü numune içinaynı yapın . Bu örnek için , bu örnek 3 litre başına 5 mol bir konsantrasyon ve 40,000 absorbansa sahiptir varsayalım.
4
her bir numune için molar emicilik katsayısını hesaplamak için Beer- Lambert yasasına kullanın. Bu denklem absorbansmolar emicilik katsayısı ile çarpılmasıyolu uzunluğu ile çarpımıçözeltisi (cuvet genişliği ) konsantrasyonuna eşit olduğunu ifade eder: A = EBC emolar emicilik katsayısı , b, yol uzunluğu , c konsantrasyon ve bir gözün soğurma gücüdür . Daha sonra bu sayısına göre absorbansı bölmek , konsantrasyon ile santimetreyol uzunluğunu çarpın. Bu örnek için ,cuvet 1 santimetre genişliğinde olduğu varsayılmaktadır. Örnek 1 , 0.05 eşittir 0.05 ile 1 çarpın . 8.000 molar absorptivitesi katsayısı 0.05 ile 400 bölün .
5
Diğer örnekler içinaynı hesaplama yapın . Numune 2 için , 0.5 bir sonuç için 0.5 ile 1 çarpın . 8.000 molar absorptivitesi sabit elde etmek için 0.5 ile 4,000 bölün . Örnek 3 için , aynı zamanda , aynı hesaplama 8,000 arasında bir neticeyi verir . Gerçek bir laboratuvar koşullarında , her örnek biraz daha farklı bir sabit üretecek . Birbirine ekleyerek ve ran bilinen numune sayısına göretoplam bölünerek her biri .
6
Ortalama tüm hesaplanmış molar emicilik sabitleri kaydedin . Artık bilinmeyen örneklerinin konsantrasyonunu tahmin etmek için elde edilen molar emicilik katsayısı kullanabilir.