Bir Maya üç hibrid sistem için yöntemler

kromozom replikasyonu , haberci RNA işleme, proteinlerin çeviri, ve gelişiminin ilk aşamalarında önemli bir kararlar DNA , RNA ve protein etkileşimine bağlıdır . Bu etkileşimler, gen ifadesi ve protein sentezinin temel biyolojik süreçleri bulunmaktadır. Bilim adamları, genellikle belirli proteinler için kodlayan genler çalışma ve proteinler ve diğer moleküllerin arasındaki etkileşimi analiz etmek için Saccharomyces cerevisiae , pişirme ve bira kullanılan maya aynı tür olarak kullanın. Maya Üç-hibrid sistemi bu etkileşimler üzerinde çalışmak için kullanılan maya iki -hibrid sistemi üç değişik biridir. Two -Hybrid System

iki melez yöntem, raportör genin ekspresyonu için bakarak protein -protein etkileşimlerini tespit etmek için kullanılır . Birçok proteinler en az iki etki , ya da ayrık yapısal ve fonksiyonel birimleri var . GAL4 , Saccharomyces cerevisiae 'de bulunan bir protein, bir DNA bağlanma alanı ( DBD ) ve bir aktivasyon alanı (AD ) sahiptir. Bu yöntemde, bir hibrid proteinDBD'ye birleştirilmiş ve AD için ikinci bir . Resim haberci gen tek birmelez birfüzyon olarak ifade edilir. Iki melez mevcut olduğunda GAL4 raportör geni , sadece ifade edildiğinden , protein -protein etkileşimi belirtilir.
Three - Hybrid System

Üç-hibrid yöntem tanımlar RNA ile protein etkileşimini tespit etmek için bir raportör geni . Ilk hibrid protein bağlayıcı etki alanı , bir RNA doğrudan kaynaşık bir DBD oluşur. İkinci bir RNA bağlayıcı proteine ​​bağlanmış GAL4 transkripsiyon faktörünün MS oluşur. RNA bağlama alanları , bir kompleks oluşturmak üzere , iki hibrid proteinlerini bağlar RNA'nın bir melez molekülü ile etkileşime girer. Kompleks oluşumu GAL4 raportör genin ekspresyonunu tetikler. Haberci gen , sadece üç hibrid kompleksinin oluşumu ile açık olduğu için, varlığı RNA ve protein etkileşimini gösterir.
One -Hybrid System

tek bir hibrid model DNA ile proteinetkileşimlerini tespit etmek için kullanılır p. Bir tek hibrid sistemDBD'ye doğrudanAD bağlayan tek bir proteini , sigortalar . Bunun yerine , bir raportör gen belirlenmesi , bu yöntem bir hedef DNA dizisini tanımalıdır özel bir protein arar. Spesifik bir proteininvarlığı DNA ile proteinetkileşimini gösterir .
One -Two Hybrid Sistemi

bir-iki hibrid yöntemi protein - incelemek için kullanılır aynı zamanda , proteinler ve protein -DNA etkileşim. Yeni geliştirilen maya soyları kullanarak , bu yöntem, protein-protein etkileşimleri ve protein -DNA etkileşim belirlemek için bir konsensüs p53 tespit etmek GAL4 raportör geni kullanmaktadır. Yöntem önemli ölçüde diğer hibrid sistemlerde elde edilen yanlış pozitiflerinoluşumunu azaltarak deneysel sonuçlarınkesinliğini artması bekleniyor .